退火是使引物与DNA单链结合，延伸是DNA聚合酶延生引物合成新的DNA链。如果引物Tm值较低则，退火与延伸通常采用不同温度，如果引物Tm值在60C以上，通常可以两步法PCR，即将退火与延生合并为一步进行，这就是所谓的两部PCR。
退火是使引物与DNA单链结合，延伸是脱氧核苷酸与DNA单链结合形成双链
