画滤液细线用的液体:丙酮(作用:溶解叶绿体中的色素)
叶绿体中的色素都能够溶解于有机溶剂丙酮中,所以,可以用丙酮提取叶绿体中的色素。
层析液(石油醚):是一种脂溶性很强的有机溶剂。(作用:溶解并分离色素)
根据叶绿体中的四种色素在石油醚中的溶解度不同来进行分离,溶解度高的在滤纸上扩散的快,溶解度低的扩散得慢。溶解度最高的是胡萝卜素,它随石油醚在滤纸上扩散得最快,叶黄素和叶绿素a的溶解度次之;叶绿素b的溶解度最低,扩散得最慢。这样,四种色素就在扩散过程中分离开来。
附:实验教学方案—叶绿体中色素的提取和分离
实验原理
叶绿体中的色素都能够溶解于有机溶剂丙酮中,所以,可以用丙酮提取叶绿体中的色素。
层析液(石油醚)是一种脂溶性很强的有机溶剂。根据叶绿体中的四种色素在石油醚中的溶解度不同来进行分离,溶解度高的在滤纸上扩散的快,溶解度低的扩散得慢。溶解度最高的是胡萝卜素,它随石油醚在滤纸上扩散得最快,叶黄素和叶绿素a的溶解度次之;叶绿素b的溶解度最低,扩散得最慢。这样,四种色素就在扩散过程中分离开来。
目的要求
1.学会提取和分离叶绿体中色素的方法和原理。 2.能分辨叶绿体中的四种色素。 材料用具
新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。
干燥的定性滤纸,烧杯( 100 mL),研钵,玻璃漏斗,吸管,剪刀,小试管,药勺,量筒(10ml),天平,试管架 丙酮,层析液,二氧化硅,碳酸钙。
方法步骤
1.提取绿色叶片中的色素
(1)取几片绿色的叶片,去掉叶柄和主脉,用天平称取5g叶片,剪碎,放入研钵中。
(2)向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙,进行充分的研磨。用量筒量取5ml丙酮,倒入研钵中,迅速充分研磨。 (3)将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中进行过滤。将滤液收集到一个小试管中,及时用棉塞将试管目塞紧。
2.制备滤纸条
取一块预先干燥处理过的定性滤纸,将滤纸剪成长 10 cm、宽 1cm的滤纸条,在距滤纸条一端 1cm处用铅笔画一条细的横线。
3.画滤液细线、
用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀地画出一条细而直的滤液细线。待滤液于后,再画2~3次。
4.分离叶绿体中的色素
将3 mL层析液倒入烧杯中,将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)略微料靠着烧杯的内壁,轻轻地插入到层析液中,随后用培养皿盖盖上烧体;注意,不能让滤纸上的滤液细线触到层析液。 5.观察实验结果
看到四种色素的颜色后,取出滤纸条,观察滤纸条上的色素带颜色、位置、宽窄,并且填写实验报告。
首先,两者都是有机溶剂。
1、画滤液细线的液体就是色素提取时用到的有机溶剂,过去用丙酮,因为挥发物质有毒,现在改用无水乙醇。原理是:色素是有机分子,可以溶解在有机溶剂中,从而将研磨后的色素提取出来,提取到的液体由于含有色素就叫色素滤过液。
2、层析液的成分主要是石油醚。主要用来分离色素。四种色素在层析液中溶解度不同,所以扩散的速度不同。就如跑步速度不同所以会分出一、二、三名一样,溶解度越大,在滤纸条上扩散的速度越快,位于滤纸条上端。
层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂,教材上给出了两种层析液配方:一种是93号汽油,另外一种为20份石油醚, 2份丙酮, 1份苯混合而成。笔者经研究提供下列4种配方供选用:a)四氯化碳加少许无水硫酸钠;b)95%的酒精;c)9份95%酒精加1份苯;d)20份汽油, 2份丙酮, 2份石油醚, 1份苯。其中采用d)配方可获得较好效果;在条件简陋状况下,也可以考虑选用配方b,经济而且简便一些,果有一定折扣。提取液的改进除丙酮外,也可用酒精替代,
叶绿素的乙醇溶液,当然和层析液不同
无水乙醇用于提取叶绿素,层析液丙酮用于分离叶绿素,色素在层析液中的溶解度不同,溶解度高的色素分子随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度低的色素分子随层析液在滤纸上扩散得慢,因而可用层析液将不同色素分离。四种色素的溶解度高低依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a 、叶绿素b。
应该是酒精。