上样量可以再减小一些,产物量太大容易拖尾。另外扩增循环数可以降低一些,防止非特异扩增大片段造成拖尾。上样总体积不要太小,如果可以至少上10ul,各孔保持一致,体积不足用1X上样缓冲液补足。缓冲液至少稍微高于凝胶,不要干跑。凝胶配置过程中注意缓冲液成分稳定,不要蒸发太多。可补一点水补充蒸发。
你这几个扩增出来的产物都在700bp左右…………