灭过菌的灰树花培养基需要及时进行接种和培菌，接种要在晴天进行。在无菌条件下，将灰树花菌种均匀撒在已灭菌并降温到30℃以下的栽培袋培养基表面，一般每瓶灰树花原种可接栽培袋80～100袋。接种后置于已消毒的阴凉通风的环境中培菌，注意防止高温。每天发菌室喷水降温，有条件加设空调，保持温度27℃以下，并定期喷5000倍氢氧化钠溶液消毒。一般25～35天可发满袋进入排菌出菇。
