(一)母种的制备 用试管制成斜面培养基，并接种原始试管种(保留种，并用于生产的母种即为生产母种，可用于扩接原种。
1．培养基配方 配方一 综合马铃薯培养基 马铃薯 200克 葡萄糖20克 磷酸氢二钾2克 硫酸镁0.5克 维生素B1 10毫克 琼脂20克 水1000毫升 PH值自然
配方二 合成培养基 马铃薯 20克 葡萄糖20克 磷酸二氢钾2克 蛋白胨10克 牛肉膏5克 酵母膏5克 硫酸镁0.8克 水1000毫升 PH值自然
2．培养基制作方法 先将马铃薯洗净去皮切成簿片，称取200克，加水1000毫升，煮沸15—20分钟，用4层纱布过滤，取其滤液并补足水至1000毫升，加入琼脂20克，再加热，琼脂溶化后，再加入其它配方中的药品。 培养基的分装，应在培养凝固前进行（琼脂培养基40℃凝固）一般用漏斗，或分装瓶，下端连接一段软橡皮管，橡皮管下面再连接一水段玻璃管，在橡皮管上安装一个止水弹簧夹，分装时将玻璃管细口插入试管内，但不要碰到管壁，每支试管装入量为度管长度1/4。装好后塞上棉塞，每10支试管扎一捆，棉塞上用塑料纸封扎好，用线绳捆扎起来。
3．灭菌 将分装后的试管扎捆好，放入高压蒸气灭菌锅，在1.1kg/C㎡压力下(锅入温度达121℃)灭菌30分钟,使微生物包括芽孢全部杀死。待压力降到0度时，慢慢放出锅内气体，趁培养基没有凝固时，将试管摆成斜面。
4．接种、培养 通过无菌操作方法将菌种接入试管斜面上，置28℃、3天后将温度降至24℃继续培养，7—15天左右，菌丝长满整个试管斜面，即成(生产)母种。
(二)原种、制备 母种接种到原种培养基上，进行扩大繁殖育种即为原种，原种一般采用广口瓶或袋装。
1．培养基配方 配方一 木屑麸皮培养基 阔树木 78% 麸皮 20% 糖 1% 石膏粉 1% 水 65%
配方二 棉籽壳木屑培养基 棉籽壳 80% 木屑15% 糖 1% 麸皮 5% 过磷酸钙 3% 石膏粉 1%
2．拌料与装袋 选用新鲜无霉变原料，根据生产所需的数量，计算配料总量，将麸皮、石膏粉均匀的混合在培养料里，糖和过磷酸钙溶于水后，按上述干料量加入水，比例为1：1、3拌匀，培养料含水量60%为宜，含水量以手紧握培养料指缝间有水欲滴为宜。堆闷30分钟后，装瓶(袋)。用机械或人工装袋稍加压实，在袋口外套入塑料环，形成象瓶子一样，然后在袋口内塞松紧适宜棉塞、或用牛皮纸包扎好。
3．灭菌 原种灭菌方法有两种，高压灭菌和常压灭菌。高压灭菌又称加压蒸气灭菌，灭菌原理：在高温(121℃以上)、高压(1.1公斤/C㎡)条件下灭菌2~3小时，将芽孢在内的微生物全部杀死。常压灭菌称流通蒸气灭菌，由于灭菌设备、条件和基本因素的不同，温度变动在90~103℃之间，其热力、穿透力不强，在一定温度下维持足够时间达到灭菌目的，通常在100℃下维持10~12小时。
4．接种与培养 不论用接种箱或接种室接种，在接种前，需对接种箱或接种室用0、2%的来苏水或漂白粉进行消毒处理，然后将灭菌过的料瓶(袋)放在箱内，用烟雾剂密闭薰蒸消毒。接种室消毒，一间房需点燃3盒50克规格烟雾剂；接种箱消毒每次仅用重量为4克，一支母种试管可接4—6瓶(袋)原种。将接种后的菌种瓶(袋)放入发菌室培养。培养室温度22~26℃，相对湿度70%以下，发菌期间应保持良好的通风条件。原种从接种到菌丝长满瓶(袋)需30—40天。
(三)栽培种制备 原种进一步扩繁，即为栽培种。栽培种一般采用塑料袋制备，用无棉盖体封口。一瓶原种可接50-60瓶(袋)栽培种。栽培种培养基配方及拌料、装袋、灭菌、接种、发菌管理与原种相同。
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