外植体如何选择和消毒？常用消毒剂有哪些？有什么特点

2025-03-05 07:28:03

推荐回答（4个）

回答（1）：

消毒剂的的选择和消毒处理时间长短取决于植物材料对消毒剂的敏感性，越幼嫩或越敏感的植物材料处理时间不宜过长，也不宜采用强消毒剂。

使用高锰酸钾还应注意，由于高锰酸钾分解放出氧气的速度慢，浸泡时间一定要达到5分钟才能杀死细菌。配制水溶液要用凉开水，热水会使其分解失效。

配制好的水溶液通常只能保存两小时左右，当溶液变成褐紫色时则失去消毒作用。故最好能随用随配。该品有刺激、腐蚀性。工业应用：该品主要用做氧化剂。

高锰酸钾：

性状与稳定性：该品为黑紫色细长的棱形结晶；带蓝色的金属光泽；式量158.04。味甜而涩。密度2.703克/立方厘米。高于240℃分解，在沸水中易溶，在水中溶解，易溶于甲醇、丙酮，但与甘油、蔗糖、樟脑、松节油、乙二醇、乙醚、羟胺等有机物或易的物质混合发生强烈的燃烧或爆炸。

水溶液不稳定。该品水溶液不稳定，遇日光发生分解，生成二氧化锰，灰黑色沉淀并附着于器皿上。高锰酸钾溶液是紫红色的。

以上内容参考：百度百科-消毒剂

回答（2）：

1、选择优良的种质

无论是离体培养繁殖种苗，还是进行生物技术研究，培养材料的选择都要从主要的植物入手，选取性状优良的种质或特殊的基因型。对材料的选择要有明确的目的，具有一定的代表性，以提高成功的几率，增加其实用价值。

2、选择健壮的植株

选取发育正常的器官或组织，再生能力强，组培易成功。组织培养用的材料，最好是从生长健壮的无病虫的植株上选取发育正常的器官或组织。因为这些器官或组织代谢旺盛，再生能力强，培养后比较容易成功。此现象可能是由于外植体内部的植物激素水平能够在接种后得以维持所致。

3、选择适宜的部位

植物组织培养几乎在植物体的各个部位都获得了成功，这些部位包括茎尖、茎段、皮层及维管组织、髓细胞、表皮、块茎的储藏薄壁细胞、花瓣、根、茎、子叶、鳞茎、胚珠和花药等。但是不同种类的植物以及同一植物的不同器官对诱导条件反应是不一致的，有的部位诱导分化率高，有的部位很难脱分化，或者再分化频率很低。

4、选择适当的时期

组织培养选择材料时，要注意植物的生长季节和生长发育阶段，对大多数植物而言，应在其开始生长或生长旺季采样，此时材料内源激素含量高，容易分化，不仅成活率高，而且生长速度快，增殖率高。若在生长末期或已进入休眠期时采样，则外植体可能对诱导反应迟钝或无反应。

花药培养应在花粉发育到单核靠边期取材，这时比较容易形成愈伤组织。百合在春夏季采集的鳞茎、片，在不加生长素的培养基中，可自由地生长、分化；而其他季节则不能。

叶子花的腋芽培养，如果在1～2月采集，则腋芽萌发非常迟缓；而在3～8月采集，萌发的数目多，萌发速度快。对于大多数植物而言，应在其生长季节开始时采样。在生长末期或已进入休眠期时取样，外植体可能对诱导反应迟钝或无反应，较难成活。

5、考虑器官的生理状态和发育年龄

一般认为，生理年龄小的幼嫩组织较生理年龄大的成熟衰老组织具有较高的形态发生能力。随着组织年龄的增加，器官的再生能力逐渐减弱甚至完全失去再生能力。

6、材料大小的选择要适宜

建立无菌材料时，取材的大小根据不同植物材料而异。材料太大易污染，材料太小，多形成愈伤组织，甚至难于成活。一般选取培养材料的大小为0.5～1.0 cm，如果是胚胎培养或脱毒培养的材料，则应更小。

组培中常用酒精和升汞消毒。Ziv等用0.3%升汞代替Ca（ClO）₂进行消毒，可降低鹤望兰的褐变程度。一般来说，延长外植体消毒时间会使消毒效果增加，但对外植体伤害也大，从而加剧褐变。因而消毒时间应掌握在一定范围内，才能保证较高的外植体存活率。

酒精渗透性强，幼嫩材料易在酒精中失绿，所以浸泡时间要短，防止酒精杀死植物细胞。升汞的渗透力弱，一般浸泡10分钟左右，对植物材料的杀伤力不大。

外植体所处状态

植体取材的不同状态具体表现为外植体生理状态、取材部位、取材时期、外植体的大小及受伤程度、外植体预处理等。幼龄材料比成龄材料褐变轻，这可以用幼龄材料的酚类化合物含量少，而成龄材料多来解释。

平吉成在研究小金海棠、八楞海棠和山定子刚生成的实生苗上切取茎尖进行组培的试验中，发现接种后褐变很轻。高度分化的叶片作为外植体，接种后则很容易褐变，而在幼嫩器官或组织（如胚）中，褐变则较轻。

以上内容参考：百度百科-外植体、百度百科-植物组织培养

回答（3）：

消毒剂的的选择和消毒处理时间长短取决于植物材料对消毒剂的敏感性，越幼嫩或越敏感的植物材料处理时间不宜过长，也不宜采用强消毒剂。一般植物材料首先在消毒前除去泥土或死组织，然后用水冲洗除去外部污染物，然后剥除外层表皮或组织。消毒时可先在70%酒精中浸泡数秒以除去空气气泡，用1.0%次氯酸钠消毒10~30分钟，或或用0.1%升汞消毒5~15分钟，之后用无菌水冲洗3~5次后接种。所用消毒液与外植体体积大致为1比10。有时为了增强消毒效果，可以采取以下一种或几种办法：将植物材料在灭菌前用十分清洁的流水（或自来水）冲洗0.5~2小时，在消毒剂中加入1滴或数滴吐温-20或80（浓度为0.08%~0.12%），在消毒过程中不时搅拌或振荡，在真空中进行消毒，多种消毒剂多次消毒处理或复合消毒处理，采用杀虫剂和杀菌剂进行表面消毒处理或适量地加入培养基

回答（4）：

1、常用的消毒剂按成分分类主要有9种：含氯消毒剂、过氧化物类消毒剂、醛类消毒剂、醇类消毒剂、含碘消毒剂、酚类消毒剂、环氧乙烷、双胍类消毒剂和季铵盐类消毒剂;按消毒效果分类有3种：高效消毒剂、中效消毒剂、低效消毒剂。当今社会提倡无毒环保，环凯推出了高效环保消毒剂。
2．常用化学消毒灭菌方法
（1）浸泡法
选用杀菌谱广、腐蚀性弱、水溶性消毒剂，将物品浸没于消毒剂内，在标准的浓度和时间内，达到消毒灭菌目的。
（2）擦拭法
选用易溶于水、穿透性强的消毒剂，擦拭物品表面，在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的。
（3）薰蒸法
加热或加入氧化剂，使消毒剂呈气体，在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的。
适用于室内物品及空气消毒或精密贵重仪器和不能蒸、煮、浸泡的物品（血压计、听诊器以及传染病人用过的票证等），均可用此法消毒。
①纯乳酸
常用于手术室和病室空气消毒。每100m2空间用乳酸
12ml加等量水，放入治疗碗内，密闭门窗，加热熏蒸，待蒸发完毕，移去热源，继续封闭2
小时，随后开窗通风换气。
②食醋
5－10ml/m3
加热水
1－2m3
，闭门加热熏蒸到食醋蒸发完为止。因食醋含
5％醋酸可改变细菌酸碱环境而有抑菌作用，对流感、流脑病室的空气可进行消毒。
此外，尚可应用甲醛或过氧乙酸等进行熏蒸灭菌
（4）喷雾法
借助普通喷雾器或气溶胶喷雾器，使消毒剂产生微粒气雾弥散在空间，进行空气和物品表面的消毒。如用
1％漂白粉澄清液或
0.2％过氧乙酸溶液作空气喷雾。对细菌芽胞污染的表面，每立方米喷雾
2％过氧乙酸溶液
8ml
经30分钟（在18℃以上的室温下），可达
99.9%杀灭率。
（5）环氧乙烷气体密闭消毒法
将环氧乙烷气体置于密闭容器内，在标准的浓度、湿度和时间内达到消毒灭菌目的。
环氧乙烷是广谱气体杀菌剂，能杀灭细菌繁殖体及芽胞，以及真菌和病毒等。穿透力强，对大多数物品无损害，消毒后可迅速挥发，特别适用于不耐高热和温热的物品，如精密器械、电子仪器、光学仪器、心肺机、起博器、书籍文件等，均无损害和腐蚀等副作用。本品沸点为10.8
℃,
只能灌装于耐压金属罐或特制安瓿中。

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