免疫组化中一抗与二抗有什么要求?谢谢!

2024-11-09 10:37:46
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回答(1):

比如一抗是鼠抗人,二抗必须是×抗鼠的。×表示可以是羊,兔,马等。一抗是单抗,二抗是多抗,是抗一类同种异型的Ig,带有特殊的可产生发光现象的标记。

条件允许尽量选择进口,一抗abcam,Santa,CST等值得信赖,二抗的话国产的就行了。

源性一抗如果需要做共定位,那么就需要不同源性的且要能够用于人组织的,可以做组化的,二抗建议选择驴抗,这样用处多;如果说是做组织化学,那么一抗源性就无所谓了只要能用于人的组织,二抗相应配套就行。

扩展资料:

抗体选择没问题,关于二抗你直接购买国产的二抗试剂盒就可以了,如中杉金桥或者博士德的都没问题,里面封闭用的过氧化氢和山羊血清都有的。按照试剂盒说明,一步一步做即可。    

免疫荧光,ABC,western blotting一抗应该可以通用,

某些抗体的说明书上会给推荐效价,有时会同时给出western blotting 和免疫组化的效价。

一点更正:

免疫荧光就是一种免疫组化方法!免疫荧光使用的是荧光抗体(荧光一抗为直接法,普通一抗加荧光二抗为间接法)。

免疫组化的二抗必须是抗一抗物种的抗原,比如说:做A动物的B蛋白所用的一抗为动物C抗动物A的B蛋白抗体,二抗就应该是动物D抗动物C抗体。

如:豚鼠抗大鼠cofilin1一抗,羊抗豚鼠二抗。二抗远比一抗便宜。

参考资料来源百度百科——免疫组化

回答(2):

当然有.
比如一抗是鼠抗人,二抗必须是×抗鼠的.×表示可以是羊,兔,马等.
一抗是单抗,二抗是多抗,是抗一类同种异型的Ig,带有特殊的可产生发光现象的标记.

回答(3):

当然有。
比如一抗是鼠抗人,二抗必须是×抗鼠的。×表示可以是羊,兔,马等。
一抗是单抗,二抗是多抗,是抗一类同种异型的Ig,带有特殊的可产生发光现象的标记。

回答(4):

一抗是鼠源的,那二抗必须是×抗鼠的,如羊,马等。
而且,你做组化时上抗体之前要先用封闭液封闭,以排除非特异性的染色,所以你用羊抗鼠的二抗,就应该用羊血清封闭;如果用马抗鼠的二抗,就应该用马血清来封闭。总之要和你的封闭液对应好。

回答(5):

一抗如果是鼠抗人的抗体,二抗应该是另一种动物抗鼠的抗体,而且以抗和二抗的动物种属原则上不应该相同。一般来说,一抗多用兔抗和鼠抗,而二抗多用羊抗。
单克隆抗体是指针对于抗原标志物上某一种抗原决定簇产生的单一种类的抗体,一般通过杂交瘤细胞技术制得;多克隆抗体是指针对抗原上多个抗原决定簇产生的抗体,一般将抗原免疫动物血清直接制得。对于一抗来说,现用单克隆抗体较多。
相对于一抗的特异性,二抗要求广谱抗体,最好能够一对多。现在购买的二抗多是二抗加亲和素生物素的复合物,与传统二抗有所不同。至于封闭液的问题,其实就是用与二抗相同种属动物的非免疫血清封闭阻断非特异性蛋白,可以视所作标本中蛋白的特异性做或不做。一般可以和二抗成套购买。