如何提高大肠杆菌表达天然构像蛋白质的产量

2025-04-12 22:51:16
推荐回答(2个)
回答(1):

你好,这点上有很多种方法可以实现。
pet应用手册你可以下下来,好好研读。
我将提高蛋白质产量的部分,简单总结如下,希望对你有所帮助。
增强可溶性和蛋白的正确折叠:
1.为避免包涵体的生成,一切能够降低蛋白质合成速率的条件均适合。温度:建议低温过夜诱导。裂解buffer:可以加入去污剂将与膜粘连的蛋白提出来。定位在周质或者胞质中表达(用有信号肽的载体等,在这种环境中利于形成二硫键,折叠正确)。
2.正确选择宿主菌,比如说一些有稀有密码子的,用origami,或者rosetta。
3.有毒的基因,用petcoco系统不错。
4.还可以好几个target proteins共表达,pet系列有许多商品化的东西。你可以去看看。
你留邮箱,我可以将手册发给你。

回答(2):

我在做两个酶的共表达,第一个表达特少,第二个还好。单个表达也是这样,你给个建议吧。该怎么办!