PCR的完整操作步骤是什么？

2024-10-30 22:12:11

推荐回答（3个）

回答（1）：

首先在PCR仪中设定程序：一般是94度变性5min，之后“94度变性、退火（不同引物温度不同）、72度”延伸共30-35个循环，再72度延伸10min，最后hold16度即可。反应体系一般有20微升或50微升，由上下游引物、buffer、dNTP、模板、Taq酶和水等组成，配好后放入PCR仪中按设定程序进行即可。

回答（2）：

1、配反应体系：引物、模板、buffer，dNTPs,酶，Mg2+,(如果是荧光定量PCR，则还有染料或探针）
2、设置热循环参数，94、55、72等
3、上机实验，如果是荧光定量PCR则实时可以观察实验过程
4、如果是常规PCR，则后面还有电泳，杂交，测序等

回答（3）：

应该保存在4℃