如何测定牛奶中蛋白质含量,要具本步骤.原理和方法,知道的说下,谢谢

实验原理：
蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化， 使蛋白质分解，分解的氮与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离， 用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数， 即为蛋白质含量。

实验仪器与试剂
（1）定氮蒸馏装置 （2） 硫酸铜
（3） 硫酸钾 （4） 浓硫酸
（5） 2%硼酸溶液
（6） 混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。
（7） 40%氢氧化钠溶液。
（8） 0.05N硫酸标准溶液或0.05N盐酸标准溶液。
实验步骤
（1）试样制备
精密称取 0.2～2.0g 固体样品，移入干燥的 100mL 或 500mL 定氮瓶中，加入 0.2g 硫酸铜，3g 硫酸钾及 20mL 硫酸，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持质瓶内液体微沸， 至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热 0.5h。取下放冷，小心加 20mL 水。放冷后，移入 100mL 容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度， 混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。
（2）定氮装置的连接
于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处， 加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸， 用调压器控制，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
（3）试样测定
向接收瓶内加入 10mL2% 硼酸溶液及混合指示液1滴， 并冷凝管的下端插入液面下，吸取 10.0mL 样品消化稀释液由小玻杯流入反应室，并以 10mL 水洗涤小烧杯使流入反应室内，塞紧小玻杯的棒状玻塞。将 10mL40% 氢氧化钠溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其缓缓流入反应室，立即将玻塞盖紧， 并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹，开始蒸馏。 蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸馏 5min。移动接受瓶，使冷凝管下端离开液面，再蒸馏 1min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以 0.05N 硫酸或 0.05N 盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。
7 结果计算
7.1计算
(V1-V2)×N×0.014
X= ——————————— ×F×100
m×10÷100
式中： X—样品中蛋白质的含量，%；
V1—样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积，mL；
V2—试剂空白消耗硫酸或盐酸标准液的体积，mL；
N—硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度；
0.014—1N硫酸或盐酸标准溶液 1mL 相当于氮克数；
m—样品的质量（体积），g(mL)；
F—氮换算为蛋白质的系数。蛋白质中的氮含量一般为15～17.6%，按 16%计算乘以6.25即为蛋白质，花生为5.46。

三聚氰胺事件的发生给中国的乳品安全敲响了警钟，在乳品企业受到巨大冲击的同时，也推动了乳品检测手段的提高。目前乳品企业收奶时使用的是比较快速的乳品分析仪，该仪器具有快速准确、成本低，无需任何化学试剂，而且能同时测定乳制品的脂肪、蛋白质、乳糖、非脂乳固体、冰点、总酸度、密度等参数。而过去普遍采用的是凯氏定氮法。有很多奶农对乳品分析仪的准确性持有疑虑，为此文将乳品分析仪和国家标准的凯氏定氮法进行检测对比。

1 实验试剂、设备

硫酸（分析纯，98%，无氮）、混合催化剂（0.4gCuSO4·5H2O，6g 无水硫酸钠，）、40%的氢氧化钠溶液、2%的硼酸水溶液、混合指示剂（0.1%的甲基红乙醇溶液和0.5%溴甲酚绿乙醇溶液等体积混合）、标定好的0.1mol/L 的盐酸标准溶液、分析天平（万分之一）、电炉、酸式滴定管、凯氏烧瓶、锥形瓶、容量瓶（100mL）、半微量水蒸气蒸馏式凯氏蒸馏装置、FOSS- 78110 乳品快速分析仪。

2 实验步骤

2.1 试样的消煮

称取奶样15g，放入凯氏烧瓶中，加入6.4g 混合指示剂，再加入20mL 硫酸和2 粒玻璃珠，稍摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于电炉上加热，开始小火，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持质瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热0.5h。

2.2 氨的蒸馏

将试样消煮液冷却，加入20mL 蒸馏水，转入100mL 容量瓶中，冷却后定容至刻度，摇匀待测。将冷凝管末端入装入20mL 硼酸吸收液和2 滴混合指示剂的锥形瓶中，蒸发器内的水中加入甲基红指示剂数滴，硫酸数滴，准确移取试样分解液10mL 注入蒸馏装置的反应室中，用少量蒸馏水冲洗进样口，塞好入口玻璃塞，再加10mL 氢氧化钠溶液，小心提起玻璃塞是指慢慢流如反应室内，见玻璃塞塞好，在入口处用水密封，防止漏气，蒸馏4min 降下锥形瓶使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏1min，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液流入锥形瓶内，停止蒸馏。

2.3 滴定

将2.2 所得的吸收液立即用0.1mol/L的盐酸标准液滴定，溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。

2.4 计算

粗蛋白质（%）=（V 滴定－V 空白）×C盐酸×0.014×6.38×V总×100/m×V用

V 空白———空白试验耗用盐酸标准溶液体积，mL；

V滴定———样品耗用盐酸标准溶液体积，mL；

C盐酸———盐酸标准溶液浓度，mol／L；

m———样品质量，g；

V总———试样分解液总体积，mL；

V用———用于反应的分解液体积，mL；

2.5 快速法

操作简单，将FOSS- 78110乳品快速分析仪器调好后，直接测定蛋白质含量。

3 实验结果（见表1）

4 小结

结果表明两种检测方法所测的数据平均存在0.02%的偏差，用FOSS- 78110乳品快速分析仪测得的值较凯氏定氮法测得值稍高一点，这也是仪器误差允许的。目前，鲜奶中蛋白质含量国家标准是2.95%，乳品企业也是按该标准每增/ 减一个百分点来奖励或扣款。尽管三聚氰胺事件的阴影还没有淡出人们的视线，加上各级部门打击和管理严格，暂时不会有人再冒险，但是为了增加奶中蛋白质的含量，是否会加入其他物质，这就需要相关部门加强监测和管理，同时从事动物营养研究的也要从营养学上研究和开发一些既能提高奶牛产奶量、奶中蛋白质含量，对动物和人类的健康又都没有危害的绿色饲料、添加剂，让类似三聚氰胺的事件不再重演。

楼下说的凯式法测不出是否掺假 ... ...
在线乳品分析仪，是间接法，定标也是按照凯式法而得出的结论

那得有专门的仪器。比如，测一下刚挤的牛奶里的蛋白含量是多少，用仪器一测就知道了。