细胞贴壁状体啊不理想

2025-03-09 13:13:12

推荐回答（3个）

回答（1）：

解决方案如下：
1.如果你手上这支细胞已经传代次数很多的话，建议复苏一支新的细胞，这是最直接的方法
2.检查培养基、胰酶、pbs中是否有污染
3.如果只有手头上的细胞，那么检测一下是否有支原体或者病毒感染，黑胶虫实际是一种细胞残留的胶质成分并不是一种污染源但是视野中会有黑色点状物好像悬浮细胞但略小，注意区别
4.贴壁不佳可以在传代或复苏前选用包被液包被培养瓶，增加细胞贴壁性，一般用多聚赖氨酸包被，效果很好，可以一试
5.有时候细胞分裂是贴壁-悬浮-分裂-再贴壁的一个过程，悬浮细胞不一定都是死细胞，可能是正在分裂的细胞，一般来说贴壁好的细胞换液一次总会有大概5-15%再次悬浮，少量的话不必过分担心
补充你的问题：观察消化时间是以你的细胞在加入胰酶后变圆开始到细胞间连接消失细胞脱落为消化完成，消化时间过短镜下观察可能会有贴壁残留，消化过久会损伤细胞导致状态不佳，建议两步法消化，效率比较高，吹打以吹散细胞为目的不必太过用力，其实吹打对细胞的损伤相比胰酶是很小的，稍加注意即可

回答（2）：

一般漂浮的细胞都是死细胞
如果确定漂浮的细胞是活的，那么可能是细胞贴壁有问题，可以通过往培养体系中加适量贴壁和铺展因子来看看贴壁情况是否改善。
如果确定漂浮细胞是死的，那么就跟细胞的生长状态有关系了。可以通过勤换培养基、经常传代等来改善细胞的生活状态。必要时可以换一种培养液试试。当然，也应该排除一下细胞是否受到了支原体、病毒、黑胶虫感染。因为这些感染一下子不会造成细胞大量死亡，其副作用是在一段时间后影响慢慢表现出来的。
消化的话一般0.25%胰酶消化1-5min。这个要根据你养的细胞的贴壁能力，可以用相差显微镜观察，发现细胞变圆就说明消化好了。吹打的话还是轻一点比较好。

回答（3）：

细胞不贴壁的原因太多了，你养的这两种细胞没必要添加贴壁因子，消化时间和吹打力度也没有过于严格的要求。首先检查一下自己的培养基是不是真货（亲身经历，假培养基害死人啊），然后可以换个品牌的培养瓶或培养板（有钱建议用NUCK），再就看是不是受到污染了，但是这些检测试剂盒通常得花不少银子，实在没办法就换到别的实验室培养看看。

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