提取RNA时氯化钠的最适浓度是多少

2024-11-16 11:46:06
推荐回答(2个)
回答(1):

用0.14mol/L的稀氯化钠溶液溶解,用1~2mol/L的浓氯化钠溶液提纯析出RNA。

在1~2mol/L的浓氯化钠溶液中,DNA核蛋白的溶解度很大,RNA核蛋白的溶解度很小;而在0.14mol/L的稀氯化钠溶液中,DNA核蛋白的溶解度很小,RNA核蛋白的溶解度很大。

因此,可利用不同浓度的氯化钠溶液,将DNA核蛋白和RNA核蛋白从样品中分别抽提出来。所以只要将提取DNA中过程里的两次氯化钠溶液对调就行了。

医用

氯化钠对于地球上的生命非常重要。大部分生物组织中含有多种盐类。血液中的钠离子浓度直接关系到体液的安全水平的调节。由信号转换导致的神经冲动的传导也是由钠离子调节的。

含氯化钠0.9%的水称为生理盐水,因为它与血浆有相同的渗透压。生理盐水是主要的体液替代物,广泛用于治疗及预防脱水,也用于静脉注射治疗及预防血量减少性休克。

以上内容参考:百度百科-氯化钠

回答(2):

rtpcr时提取rna的浓度和纯度要求:浓度20ng/ul以上足够了,如果用的是组织提取,浓度一般很高,可以达到几百甚至几千。如果你用的是病毒、少量细胞,浓度低一些也没有关系。  纯度需要用仪器测一下。260/280理论值应该有2.0以上,260/230值1.2以上基本合格。  RT-PCR:最重要的是RNA是否有明显降解,这个需要跑电泳看。一般来说28S应该比18S亮1.5-2.0倍,说明提取得不错。  反转录·聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)是将RNA的反转录(reversetranscription)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA,关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。  提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用反转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板经行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。