A、用酶解法除去新鲜紫色洋葱鳞片叶的外表皮细胞的细胞壁得到原生质体，则没有了细胞壁，不可能发生质壁分离了，A正确；
B、将去掉细胞壁的原生质层置于0.3g/mL的蔗糖溶液中，由于细胞液浓度低，则原生质层通过渗透作用失水，B错误；
C、将去掉细胞壁的原生质层置于0.3g/mL的蔗糖溶液中，由于细胞液浓度低，则原生质层通过渗透作用失水，原生质层收缩，颜色加深，C错误；
D、将去掉细胞壁的原生质层置于0.3g/mL的蔗糖溶液中，由于细胞液浓度低，则原生质层通过渗透作用失水，则原生质层的失水能力逐渐变小而吸水能力逐渐增大，D错误．
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