注：本资源来源于网络。
(1)通常如果使用Bio-Rad的标准湿式转膜装置，可以设定转膜电流为300-400mA，转膜时间为30-60)分钟。也可以在15-20mA转膜过夜。转膜时也可以使用碧云天的多功能电泳仪(带定时)。具体的转膜时间要根据目的蛋白的大小而定，目的蛋白的分子量越大，需要的转膜时间越长，目的蛋白的分子量越小，需要的转膜时间越短。
(2)在转膜过程中，特别是高电流快速转膜时，通常会有非常严重的发热现象，最好把转膜槽放置在冰浴中进行转膜。
(3)转膜的效果可以观察所使用的预染蛋白质分子量标准，通常分子量最大的1-2条带较难全部转到膜上。转膜的效果也可以用丽春红染色液对膜进行染色，以观察实际的转膜效果。也可以用考马斯亮蓝快速染色液对完成转膜的SDS-PAGE胶进行染色，以观察蛋白的残留情况。
我最近转的蛋白石是43KD，60V电压100毫安电流，2个小时，效果不错。估计27KD的话有一个半小时就足够了。
以前最少转过80KD左右的，用了90v电压，时间4小时左右，30左右的电压减到70v应该就够了吧，时间再短点，试几次就有数了。
跟那没关系吧，上样量或者一抗量调节一下吧。可能是上样量低，也可能是抗体不敏感。转膜时间和电压正常就行。