如何用EXCEL绘制ELISA标准曲线及计算样品浓度

用EXCEL绘制ELISA标准曲线及计算样品浓度的方法和详细的操作步骤如下：

1、首先，打开excel软件，将所得数据以先y后x的两列输入，将文本格式设置为居中，并将单元格格式设置为三位小数和一位小数，如下图所示。

2、其次，使用光标选择整个数据范围，依次选择选项卡“插入”-->“图表”-->带数据标签的散点图，如下图所示。

3、接着，依次单击上方的选项卡图表工具-->布局-->添加数据标签-->上方，如下图所示。

4、然后，更改图表的水平和垂直标题，如下图所示。

5、随后，去除网格线，如下图所示。

6、最后，产生样品浓度，如下图所示。这样，所有操作都完成了。

1、打开excel软件，将所得数据以先y后x的两列输入，设置文字格式为居中，单元格格式为三位小数与一位小数。

2、光标选中整个数据范围，选择选项卡插入，图表，带数据标签的散点图。

3、单击选项卡图表工具，布局，添加数据标签，上方。

4、更改图表的横纵坐标题。

5、去除网格线，一般作图题是要去除网格线的，这样显得干净整洁。

6、样品浓度产生了。

在ELISA实验结束后，我们得到的是经酶标仪得出的标准品以及样本的OD值。其中，标准品的浓度已知，我们可以利用标准品的OD值及其相对应的浓度，以 OD值为横坐标，浓度为纵坐标，做一条标准曲线，并用公式表示出来。这样，我们把样本的OD值以X值代入，便可求出Y值，即样本浓度。
1、首先，将数据整理好输入Excel，分别为经酶标仪读出标准品的OD值及其对应的浓度值。 

2、拖动鼠标选取完成的数据区，并点击图表向导，在图表类型中选“XY散点图”，并选择子图表类型的“散点图”（第一个没有连线的），如下图所示。

3、点击“下一步”，出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改，如果是纵向列表就改选“列”。


4、在做ELISA标准曲线，并通过此曲线求样本浓度时，因样本OD值是已知的，因此我们需要将OD值设为X。根据上图我们可以看到，横坐标X值为OD值，纵坐标Y为标准品浓度，这正是我们想要的。
有时需要我们手动选择X值，这时可以点击“系列”来更改，如下图。


如果要对横坐标和纵坐标进行调换，我们可以就点击X值和Y值文本框右边的小图标，结果如下图：

出现上图后，拖动鼠标选取正确的数据区域以调整X或Y。
5、调好之后，然后点击“下一步”出现图标选项界面，如下图。

6、点击“下一步”，在弹出的窗口再点击“完成”，现在一张带标准值的完整散点图就已经完成，如下图。


7、到了这一步，散点图便完成了。我们可能会问，曲线在哪里啊？
其实很简单，先点击图上的标准值点（记住一定要点选上），然后单击右键，点击“添加趋势线”。弹出趋势线类型选择对话框，有线性，对数，多项等选项，如下图：


8、在选择之前，我们先对上图做一下肉眼观察，如果那些点能连成一条直线，或接近直线，我们就选择“线性”，意思就是出来的趋势线是一条直线，相应的该直线的方程就是y=ax
+b 的形式。不过一般的ELISA都不会是所有的标准点呈完全的线性关系的，也就是说不是一条完全的直线，这时我们可以选择“多项式”，多项式后面还有“阶 数”的选择，也就是说求出来的方程是几次方，我们一般选“2阶”，即出来的方程为y=ax2+bx+c. 选择完毕后，弹出以下窗口。


9、 趋势线也就是标准曲线在此便显示出来了。接下来我们需要将公式显示出来，以根据样本的OD值计算其浓度值。在鼠标点选该线（一定要选中，选中后出现下图的 样子即线由很多店标识出来），单击鼠标右键，选择趋势线格式。我们在弹出的窗口中选择“选项”选项卡，出现下图，我们选择显示公式，显示R方，即相关系 数，这时公式与R方值便都显示出来了。



我们将样本的OD值作为X代入上述方程，求出来的便为浓度值了。
一般ELISA的标准曲线的相关系数要达到0.95以上，本例中为0.9999，非常不错的曲线，这样就保证了由该曲线及其方程求出的样本浓度具有很强的可信性。

理论上应该是相同的，稀释：0.01mol / L ph7.2pbs有的会添加一些牛血清白蛋白或血清
防腐剂是为了保证最佳的环境测试的物质，并与固相载体大小接触的一致性（同体积的样品和对照样品）。对整个反应过程无影响。