作革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚?其染色成败的关键是什么?

如果过于浓厚，菌体会很难吸附到载玻片上，染色冲洗过程中很容易别冲下来，表层被染色，但是内层菌体很难染色。

革兰氏染色是用来鉴别细菌的一种方法：这种染色法利用细菌细胞壁上的生物化学性质不同，可将细菌分成两类，即革兰氏阳性与革兰氏阴性。

由丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰于1884年所发明，最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏肺炎菌之间的关系，后推广为鉴别细菌种类的重要特性之一，对由细菌感染引起的疾病的临床诊断及治疗有着广泛用途。

扩展资料：

通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密；

故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；

而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出。

太过浓厚会影响染色判断是阳性菌还是阴性菌。
染色成败的关键是脱色时间！如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误以为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被认为是革兰氏阳性菌。

厚了不能完全着色，脱色也麻烦。

试剂合格，操作步骤正确，基本上会染好的。

可练习几次，镜检后，看效果，可根据效果，适当增加或减少每一步的时间。