PCR产物3000bp左右,稳定性很差,是什么原因

2024-12-04 10:36:58
推荐回答(2个)
回答(1):

PCR的主要质量是由引物决定的,与中间结构关系不大。可能的原因有两个:
1. 引物匹配区内可能含有高度重复序列
2. 引物可能与模板上的其他序列有非特异性互补

因此建议:
1. 用软件重新检查引物序列的质量,避开重复、非特异性互补序列
2. 在能扩增出条带的范围内,选择最高最火温度以增强特异性
3. 使用长链高保真(Long and accurate, LA)聚合酶。

回答(2):

还是和酶有关吧。换进口的试试