pH值对酶活性的影响

pH对酶活性的影响

一．目的
1．了解pH值对酶促反应速度影响。
2．掌握测定唾液淀粉酶活性的原理及定性方法。

二．原理
1．酶：由活细胞产生的，对其特异底物起高效催化作用的蛋白质。
2．酶促反应：酶所催化的化学反应。
3．影响酶促反应速度的因素：[S]、[E]、pH、温度、激动剂与抑制剂
过酸过碱都能使酶蛋白变性而使其丧失活性。在不致使变性的pH值范围内，酶的活性会因pH值不同而不同。由于酶是一种蛋白质，在不同氢离子浓度下，其解离的情况不同，但往往只有一种情况下才是该酶的最高活力，此时pH值称为酶的最适pH值。倘若其作用条件偏离最适pH值任何方面，都将引起酶活性的降低，减慢酶促反应速度。
唾液淀粉酶能使淀粉水解成一系列比较简单的化合物，最终产物为麦芽糖，利用其与碘液的不同呈色反应，即可推知淀粉酶水解淀粉的程度和pH对唾液淀粉酶的活性影响，并可指出唾液粉酶的最适pH。

淀粉 → 紫色糊精 → 红色糊精 → 麦芽糖
(遇碘呈蓝色、遇碘呈紫色、遇碘呈红色、遇碘呈淡黄色)
制备唾液：将放一薄层棉花的漏斗置于10ml量筒顶端，5名以上的学生吐1ml唾液，倒入100ml量筒中，用蒸馏水将小量筒冲洗倒入大量筒中，加蒸馏水至100ml，用吸量管混匀唾液。
取试管3支，编号，按表加各种试剂。
摇匀放入37℃水浴中保温3分钟，用滴管吸取pH6.8管内液体一滴，在白瓷盘中用碘液检查是否水解完全，然后向各管加碘液3滴，观察结果解释之。

你自己再看一下这个网

生物体内不同的酶有它们对应的最适pH,例如胃蛋白酶，它的最适pH
为1.5-2.2，因此可以在胃酸的环境下发挥作用，其他的酶的最适pH一般都接近中性。过酸或过碱都能使酶的分子结构遭到破坏而失去活性。

过氧化氢酶可通过判断气泡产生的多少来测定pH值对酶活性的影响
用淀粉的不好...因为在碱性条件下碘液会反映。淀粉会水解。（突然忘记是酸性还是碱性。）总之用过氧化氢会比较好。你再套下模式就OK拉

设置几个梯度ph，其它因素全部相同，让酶与底物在相同的条件下发生反应，再测OD值，绘制
PH对酶活性的影响曲线

H2O2和过氧化氢酶。看气泡多少。